细胞系（cell line）指原代细胞培养物经首次传代成功后所繁殖的细胞群体。细胞培养（cell culture）是指在体外模拟体内环境（无菌、适宜温度、酸碱度和一定营养条件等），使之生存、生长、繁殖并维持主要结构和功能的一种方法。细胞培养技术是细胞生物学研究方法中重要和常用技术，通过细胞培养既可以获得大量细胞，又可以借此研究细胞的信号转导、细胞的合成代谢、细胞的生长增殖等。

　　基本过程

　　（一）细胞复苏

　　1.将冻存细胞从液氮中取出后，在37℃水浴锅内不断摇动促进其融化。

　　2.移人15ml离心管中，加入10ml预热的DMEM完全培养基，轻轻吹匀，离心，2000rpmX2min，弃上清液。

　　3.加入10ml DMEM培养基清洗，弃上清液。

　　4.加入10ml DMEM完全培养基，轻轻吹打，接种于10cm盘中，在含5%CO₂的细胞培养箱中培养。

　　（二）细胞传代

　　1.细胞密度达到80%~90%时．去培养基，10ml PBS清洗2次。

　　2.加入3ml含0．25%EDTA的胰蛋白酶，放人细胞培养箱3min。

　　3.加人1ml DMEM完全培养基终止胰酶消化，转移至15ml离心管。

　　4.加入10ml PBS清洗细胞培养盘，转移至15ml离心管，2000rpmX2min，弃上清液。

　　5.加入10ml PBS（经高压灭菌，保存于40C），吹匀，吸取10微升进行计数，按照1×106/盘接种，在含5%CO₂的细胞培养箱继续培养。

　　（三）细胞冻存

　　1.细胞密度达到80%～90%时，去培养基，10ml PBS清洗2次。

　　2.加入3ml含0.25%EDTA的胰蛋白酶，放人细胞培养箱3min。

　　3.加入lmlDMEM完全培养基终止胰酶消化，转移至15ml离心管。

　　4.加入10ml PBS清洗细胞培养盘，转移至15ml离心管，2000rpmX2min，弃上清液。

　　5.加入lml冻存液（90%血清，10%DMSO），放入冻存盒内（盒内有异丙醇，以保证温度降低的速度），立即放入一80℃冰箱内，过夜，第二天放入液氮中，可以保存至少两年，如不放人液氮，可以保存三个月。