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shRNA载体构建
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  shRNA是一段短发夹RNA,可通过RNAi途径沉默基因的表达。一般将siRNA正义链、反义链及Loop相连得到目的序列,构建至含有高效启动子的表达载体。shRNA表达载体在真核细胞中可产生siRNA,产生基因沉默的效果。

  实验步骤:

  1.合成Nestin干扰序列

  2.干扰序列退火

  3.将Nestin干扰序列克隆至载体质粒

  4.慢病毒包装与转染